Diseño y reparación de un inmunosensor electroquímico para la detección de Brucella spp en soluciones acuosas contaminadas in vitro

Abstract

Brucella spp es un género de bacterias Gram negativas conocido principalmente por ser productor de la enfermedad brucelosis, una zoonosis que ocasiona importantes problemas de salud. Las bacterias son trasmitidas usualmente por vía digestiva, respiratoria, cutánea y conjuntival. Existen distintos métodos directos e indirectos para la identificación de esta bacteria patógena, aunque pocos son electroquímicos, por tanto es fundamental, el desarrollo de un biosensor específico para su diagnóstico. El principio de detección de un biosensor se basa en la interacción específica entre el compuesto o microorganismo de interés y el elemento de reconocimiento, transformando la respuesta del mismo en una señal eléctrica indicativa de la presencia del analito. El objetivo de esta investigación fue diseñar y preparar un inmunosensor electroquímico para la detección de Brucella spp en soluciones acuosas contaminadas in vitro. Metodología: fue una investigación proyectiva con diseño de laboratorio, contemporáneo y longitudinal. Se usó un electrodo de oro modificado con monocapas autoensambladas de tiourea, posteriormente se inmovilizó el Ac(+), Ac(-) y el Ag-RB al electrodo modificado, para identificar la formación del inmunocomplejo. Resultados: se realizó la preparación y caracterización electroquímica de los electrodos de oro en H2SO4 0,5 M, además se realizaron VC en KOH 0,5 M para comprobar la estabilidad de la unión Au/TOU. Se optimizaron parámetros como pH, velocidad de barrido, tiempo de incubación y el volumen mínimo necesaria del Ag en solución. Se realizaron VC para comprobar la afinidad del electrodo de oro desnudo por el Ac+, y por último se estudió la adsorción del inmunocomplejo Ag-Ac(+). Conclusiones: se encontró estabilidad en la inmovilización de la monocapa de tiourea, además el tiempo de incubación fue de 30 minutos, velocidad de barrido de 100mV/s., y pH 6,42, logrando el reconocimiento de Brucella spp inmovilizada y en solución.