Estudio de la composición proteica de fluidos de quistes de mama en pacientes del seguro social de la ciudad de Valera

Abstract

El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo general evaluar el perfil proteico y la actividad específica proteasa en fluidos de quiste de mama. Metodológicamente, la investigación es experimental; se usan tres métodos de análisis químico a saber: electroforesis desnaturalizante SDS-PAGE en geles de poliacrilamida, para identificar el contenido proteico del material biológico; la espectrofotometría que permite cuantificar la concentración de las proteínas totales presentes en las muestras y por último, la técnica de placas de agarosa para la determinación de actividad específica proteasa. Se examinaron doce (12) muestras provenientes seguro social "Juan Montezuma Giannary" de la ciudad Valera-Edo. Trujillo. Los resultados obtenidos al aplicar el primer método fueron dos patrones de bandeo característicos de los geles de resolución al 10% y 12,5%, conformados por 13 y 9 bandas a través de las cuales se identificaron 3 macromoléculas; Lisozima, Zn-α2-glicoproteína y Albúmina cuyos pesos moleculares fueron 14,3 KDa, 39 KDa y 68 KDa. De ellas, la primera proteína se relacionó con cáncer de mama y las dos últimas forman parte de la composición de los fluidos de quiste de mama estudiados por Celis y Cols. (2008). Con la espectrofotometría se obtuvo la concentración de proteínas y ácidos nucleicos de las muestras, donde se observó que la muestra 12V presentó en mayor proporción estos valores (186 mg/ml y 6,5 mg/ml). cabe destacar que la contribución de este estudio se evidenció al utilizar los resultados anteriores como valores de entrada para determinar la actividad específica proteasa de las proteínas presentes en fluidos de quistes de mama. luego de usar las placas de agarosa en condiciones ensayadas de temperatura (-4°C), tipo de sustrato y concentración (leche karla: 0,31g - 0,62g), así como el pH del buffer (8,6) y el tiempo de reacción (24 horas) para visualizar la formación de halos, se halló el marcador actividad específica proteasa por medio del cual se determinó que las muestras que presentaron mayor pureza fueron la 1B, 5V y 11V. De igual forma la muestra 12V fue la que presentó menor actividad y una expresión molecular de menor cantidad de proteína por mayor cantidad de ácidos nucleicos.