Estandarización de un sistema PCR-SSCP de la región GP5+/GP6+ del gen L1 para la detección y tipificación de los 17 tipos de virus de papiloma humano (VPH) más comunes en el estado Mérida-Venezuela

Abstract

El cáncer cervical es una de las neoplasias que afecta los órganos reproductivos de la mujer y el Virus de Papiloma Humano (VPH) es su agente causal. Uno de los métodos para la detección del virus es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a partir del marco de lectura del gen L1, mediante los oligonucleótidos MY09IMYll y GP5+/GP6+ y la reacción anidada que aumenta su sensibilidad, pero, la longitud del amplificado GP5+/GP6+ es de 150 bp, e impide el uso de enzimas de restricción para su tipificación, por ello se estandarizó un sistema de PCR-SSCP de la región GP5+/GP6+ para aplicarlo como sistema diagnóstico de rutina para la tipificación viral, seleccionando muestras de pacientes diagnosticados con uno de los 17 tipos virales, se amplificó la región GP5+/GP6+ a partir del amplificado MY09IMYll y se sometieron a SSCP para evaluar los patrones de movilidad electroforética, posteriormente se secuenciaron aquellas muestras con patrones diferentes. Se concluyó que los patrones migratorios de cada tipo viral fue semejante aunque difirieron entre los diversos tipos, lo que indicó que la región GP5+/GP6+ es altamente conservada para cada tipo viral.