Ubicación subcelular de la proteína PER-ARNT-SIM-Fosfoglicerato Quinasa-like (PAS-PGK-like) en epimastigotes de Trypanosoma cruzi

Abstract

Fosfoglicerato Quinasa (PGK) es una enzima que cataliza la transferencia del grupo fosfato desde 1,3-bifosfoglicerato al complejo ADP-Mg, generando 3-fosfoglicerato y ATP-Mg; la primera fosforilación a nivel de sustrato de la vía glucolítica. Recientemente se identificó en Trypanosoma cruzi un gen que codifica para una proteína PGK putativa que correspondería a la cuarta isoenzima en dicho organismo, la cual posee un dominio PAS; por lo que se denominó PAS-PGK-like. Dado que los dominios PAS se encuentran relacionados con la detección de variables fisicoquímicas a nivel celular, la proteína PAS-PGK-like podría tener gran importancia en el proceso de adaptación metabólica del parásito a los distintos ambientes en los cuales se desarrolla su ciclo de vida. Por lo tanto, como un acercamiento al rol fisiológico que cumple la proteína PAS-PGK-like en el parásito, el presente estudio tuvo como objetivo determinar la ubicación subcelular de la misma, en epimastigotes de Trypanosoma cruzi, empleando las técnicas de centrifugación diferencial y permeabilización selectiva con digitonina; además de evaluar sus niveles de expresión en la curva de crecimiento del parásito, en medio LIT, mediante inmunoensayos. Los resultados obtenidos muestran que la proteína PAS-PGK-like posee una ubicación dual, la misma se encuentra ubicada principalmente en el glicosoma y en la mitocondria, en epimastigotes de Trypanosoma cruzi. Esta proteína se encontró asociada a la membrana de tales organelos; además, se observó que la misma posee mayores niveles de expresión, en la fase estacionaria del crecimiento del parásito. Finalmente, se plantea la posibilidad de que PAS-PGK-like funcione como sensor de la disponibilidad de glucosa siendo modulada por cambios de pH en el glicosoma; mientras que en la mitocondria, el dominio PAS podría detectar variaciones en la disponibilidad de grupos hemo, regulando una cascada de señalización, que conlleva al incremento de las ROS, en el estadio de epimastigote de Trypanosoma cruzi.