Aislamiento, identificación y detección de microorganismos, con actividades biológicas, procedentes de las aguas de los manantiales termales La Mitisús y Santa Apolonia del Estado Mérida

Abstract

Se realizó un estudio microbiológico en muestras de aguas obtenidas de los manantiales termales de Santa Apolonia y La Mitisús, con el objeto de aislar, identificar y detectar microorganismos con posibles actividades biológicas. Se logró aislar 21 cepas bacterianas, por el método de filtración de membrana y empleando diferentes medios de cultivos. La mayor parte de las cepas aisladas en ambos manantiales fueron bacterias Gram negativas. Se determinó que 18 de las cepas asiladas en ambos manantiales termales fueron bacterias Gram negativas no fermentadoras (BGNNF), por lo que fueron identificadas a nivel de género y especie, empleando el sistema de identificación comercial API© 20NE. Para el manantial termal de Santa Apolonia las especies encontradas fueron Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas aeruginos y Burkholderia cepacia, siendo esta última la especie de mayor frecuencia (62,5%). En cuanto al manantial termal de La Mitisús las especies halladas fueron Ralstonia pickettii, Pseudomonas stutzeri, Shewanella putrefaciens y Comamonas testosteroni, la cual fue la especie con mayor presencia (70%) en este manantial. Con respecto a las bacterias Gram positivas aisladas, específicamente cocos Gram positivos, se encontraron en baja proporción y según las pruebas bioquímicas realizados estas corresponden al género Staphylococcus. Empleando el método de difusión en Agar, se evaluó la capacidad antagónica de las cepas aisladas frente a diferentes cepas ATCC, observándose que las cepas pertenecientes a las especies Burkholderia cepacia, Pseudomonas fluorescens y Pseudomonas aeruginosa obtenidas en las muestras del manantial termal de Santa Apolonia inhibieron el crecimiento del hongo filamentoso Aspergillus niger. También se observó que las especies Pseudomonas fluorescens y Pseudomonas aeruginosa presentaron efecto antibacteriano contra bacterias Gram negativas y Gram positivas. Adicionalmente se realizaron pruebas de actividad enzimática que reflejaron que las cepas de las especies Burkholderia cepacia y Pseudomonas fluorescens, presentaron actividad enzimática amilolítica y proteolítica. Finalmente se realizaron estudios de susceptibilidad antimicrobiana a las BGNNF por el método de Kirby Bauer, donde se observó que el 100% de las cepas aisladas fueron sensibles a la mayoría de los antibióticos utilizados. Este trabajo constituye el primer reporte del aislamiento las especies Ralstonia picketti, Shewanella pufrefaciens y Comamonas testosteroni en aguas termales de Venezuela.

This study is reporting a microbiological analysis of water samples obtained from the hot spring waters of Santa Apolonia and La Mitisus in order to isolate, identity and detect microorganisms with potential biological activities. Twenty one bacterial strains were isolated, using membrane filtration method and different culture media. Most of the strains isolated in both springs were Gram-negative bacteria. It was determined that 18 of the strains isolated in both hot springs were Gramnegative bacteria not fermented (NFGNB), so they were identified to the genus and species level, using the identification commercial system API@ 20NE. In the thermal spring samples of Santa Apolonia the species found were Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas aeruginosa and Burkholderia cepacia, the most trequent specie was Burkholderia cepacia (62.5%). In thermal spring of La Mitisus the species found were Ralstonia pickettii, Pseudomonas stutzeri, Shewanella putrefaciens and Comamonas testosteroni, the most fequent specie in this spring was Comamonas testosteroni (70%). In regards to the Gram-positive bacteria isolated, specifically Gram positive cocci, were found in low proportion and according to the biochemical tests, correspond to the genus Staphylococcus. The agar diffusion method was used to assess the capacity of the antagonistic strains isolated against different ATCC strains, observing Burkholderia cepacia, Pseudomonas fluorescens and Pseudomonas aeruginosa isolated from thermal spring of Santa Apolonia, with inhibited the growth of the filamentous fungus Aspergillus niger. The species Pseudomonas fluorescens and Pseudomonas aeruginosa presented antibacterial effect against Gram-negative and Grampositive bacteria. Strains of the species Burkholderia cepacia and Pseudomonas fluorescens presented amylolytic and proteolytic enzymatic activity. Finally in the studie done of antimicrobial susceptibility to the NFGNB by the Kirby Bauer method, it was observed that 100% of the isolated microorganisms were sensitive to the most antibiotics used. This work constitutes the first report of isolation of Ralstonia pickettii, Shewanella putrefaciens and Comamonas testosteroni in hot spring waters of Venezuela.