Estudio fitoquímico y análisis de diferentes actividades biológicas de las hojas de Vismia guianensis (Aubl.) Pers. (Hypericaceae) recolectadas en el Edo. Portuguesa-Venezuela

Abstract

De las hojas de Vismia guianensis (Aubl.) Pers. (Hypericaceae), se aislaron nueve compuestos entre los cuales se encuentran Sesamina, Friedelina, Vismiaquinona y Lupeol, considerados marcadores taxonómicos, además de, Friedelano, el cual es poco frecuente en la naturaleza y no ha sido reportado previamente para el género Vismia. Por otro lado, se aislaron cuatro compuestos que no presentan ninguna relación química con los aislados previamente en el género, sin embargo, la presencia de tres de estos se debió posiblemente a acumulación de residuos de productos sintéticos, tales como, herbicidas y fertilizantes presentes en el suelo. La caracterización de los compuestos aislados y purificados en el presente estudio se realizó por las técnicas de resonancia magnetica nuclear RMN1H (uni y bidimensional) y RMN13C, cromatografia de gases acoplada a espectrometría de masas (CG-EM) y cristalografía. Diferentes actividades biológicas fueron evaluadas en los extractos y compuestos puros aislados de la especie en estudio. La actividad citotoxica en células normales derivadas de riñón de embrión de mono Rhesus demostró que tanto el extracto de las hojas en metanol como las fracciones derivadas de éste no presentaron citotoxicidad. Actividad antibacteriana fue evaluada tanto en los extractos como en compuestos puros observándose que EMDA, EMM Y EMDA 11 (Friedelina) mostraron amplio espectro de inhibición en bacterias Gram positivas (S. aureus y E. faecalis) con valores de CIM entre 12.5 ug/mL y 10.000 ug//mL y Gram negativas (E. coli, K. pneumoniae y P. aeruginosa) con valores de CIM entre 4 ug/mL y 20.000 ug/mL, mientras que EMDA 30 (Sesamina) solo inhibió el crecimiento de S. aureus y E. faecalis a la concentración de 400 ug/mL, respectivamente. Por su parte, EMD 90 (Sulfato de amonio) resultó ser activo contra E. coli, K pneumoniae y P. aeruginosa en un rango de concentración entre 4 ug/mL y 12,5 ug/mL. Con respecto a la actividad antifúngica, la misma se ensayó contra cinco cepas de Candida y una de Cryptococcus. observándose que los extractos EMD y EMA presentaron actividad a una CIM de 20.000 ug/mL mientras que los compuestos EMA 7 (Sulfanilamida) y EMAM 36 (Acetanilida) mostraron inhibición del crecimiento de C. albicans, C. krusei y C, parasilopsis con valores de CIM de 400 ug/mL, respectivamente. En relación a la actividad larvicida, se utilizaron cepas susceptibles de Aedes aegypti (L.), no observándose ningún resultado positivo. Finalmente, la actividad antioxidante ensayada usando la técnica de DPPH, demostró la capacidad secuestrante de radicales libres de los extractos EMAM, EMM y EMA con valores de IC5o entre 0.096 y 3.311, mientras que, EMAM 58 (Vismiaquinona) se destacó de entre los compuestos puros aislados mostrando una elevada actividad antioxidante con un valor de IC50 de 0.153. Sesamin, Friedelin, Vismiaquinone and Lupeol were among the nine compounds isolated from Vismia guianensis (Aubl.) Pers. (Hypericaceae) leaves considered taxonomic markers, along with, friedelane, less frequent in nature and has not been reported for Vismia genus previously. On the other hand, four compounds with no chemical relationship to the ones previously reported for this genus, were also isolated, however, presence of these three compounds would possible be due to accumulation of synthetic product residues, such as herbicides and fertilizers present in soil. Characterization of isolated and purified compounds in present investigation was carried out by nuclear magnetic resonance 1H NMR (one and two dimensional), 13C NMR, gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) and crystallography. Different biological activities were evaluated in extracts and pure isolated compounds from species under investigation. Cytotoxic activity assayed in normal kidney monkey embryo showed that both, leaves methanol extract and fractions eluted from it, did not show any toxic activity. Antibacterial activity was evaluated in extracts as well as in pure compounds revealing that EMDA, EMM and EMDA 11 (Friedelin) have a wide range of activity in Gram positive bacteria (S aureus and E. faecalis) with MIC values ranging from 12.5 ug/mL to 10000 ug/mL and Gram negative (E. coli, K pneumoniae and P. aeruginosa) with MIC values between 4 ug/mL and 20000 ug/mL, whereas EMDA 30 (Sesamin) caused growth inhibition of S. aureus and E. faecalis at concentration of 400 ug/mL, respectively. Furthermore, EMD 90 (ammonium sulfate) was active against E. coli, K pneumoniae and P. aeruginosa at concentration between 4 ug/mL and 12.5 ug/mL. Regarding antifungal activity, it was evaluated in five Candida strains and one Cryptococcus strain showing that EMD and EMA extracts demonstrated activity at MIC values of 20000 ug/mL while EMA 7 (Sulfanilamide) and EMAM 36 (Acetanilide) showed growth inhibition of C. albicans, C. krusei and C. parasilopsis with MIC values of 400 ug/mL, respectively. In relation to larvicide activity, Aedes aegypti (L.) strains were assayed but none activity was observed. Finally, antioxidant activity evaluated by DPPH method showed free radicals scavening capacity on EMAM, EMM and EMA extracts with IC5o values between 0.096 and 3.311 while EMAM 58 (Vismiaquinone) distinguished from the rest of isolated components showing a high antioxidant activity with IC50 of 0.153.