Evaluación de la inmunogenicidad de proteinas ancladas mediante Glicosil-fosfatidil-Inositol (GPI) a la membrana de Trypanosoma cruzi en un modelo experiementaltal

Abstract

El empleo de ensayos inmunológicos en modelos vertebrados es realizado con el fin de constatar el desarrollo de la respuesta inmune contra el inmunicen utilizado y la consecuente producción de anticuerpos específicos, de tal modo que el objetivo de esta investigación consistió en evaluar las propiedades inmunológicas de las proteínas ancladas mediante GPI a la membrana de Trypansoma cruzi en un modelo experimental vertebrado. El tipo de investigación fue un estudio explicativo de diseño experimental. Metodológicamente, se realizó la técnica de fraccionamiento X

y purificación utilizando el detergente no iónico Tritón X-114, arrojando un rendimiento de alrededor del 7% a partir de proteínas totales del parasito, posteriormente se procedió a la realización de una separación electroforética SDS-PAGE para constatar el estado de viabilidad de las proteínas, continuamente se procedió a la determinación de la concentración de las proteínas ancladas mediante GPI aplicando el método de Lowry obteniendo una concentración de 1,77μg/μl, posteriormente se aplicó el esquema de inmunización planteado que consistió en 3 dosis de las proteínas purificadas en combinación con el adyuvante incompleto de Freund y la recolección de un total de 5 muestras de suero sanguíneo representativas de cada etapa de inmunización. Los sueros resultantes se les aplico las técnicas inmunológicas de TAD y Western blot, demostrando así la positividad del ensayo, llegando a la conclusión que las proteínas ancladas mediante GPI de la membrana de Trypansoma cruzi son inmunogenicas, capaces de activar el sistema inmune humoral generando así la producción de anticuerpos que fueron detectados desde la primera semana de inmunización.