Interacción celular en leishmaniasis cutánea experimental

Abstract

En el presente estudio, 1x103 promastigotos de Leishamania braziliensi (MAMU- 93) y L. mexicana(574) ( aislado de referencia internacional), fueron inyectadas por la vía intradermal en la región plantar de los tarsos posteriores de dos grupos de ratones BALB/c, con el fin de conocer la respuesta celular y la activación de las células epidermales de Langerhans (CL) en el sitio de la inoculación de estos parásitos. Cambios morfológicos en los promastigotos de L. braziliensis fueron detectados en los frotis de las muestras de piel coloreadas con Giemsa. Estos parásitos mostraron forma ovoide, algunos con un corto flagelo entre los 30 minutos (min) y 1 hora (h) post inyección (pi). Estas muestras también mostraron células inflamatorias tales como, macrófagos normales (McN) (28,0% y 68,25%) a los 30 min y 6 semanas (sem) pi respectivamente, macrófagos activados (McA) (74,3%) a los 30 min pi, neutrófilos (N) (31,12%) a las 5 h pi, linfocitos (L) (3,0%) a las 3 sem pi, linfocitos degradados (LD) (3,0%) a los 2 d pi, monocitos (M) (4,33%) a los 5 d pi y monocitos activados (MA) (31,6%) a las 5 h pi. Las secciones de piel coloreadas con Giemsa Colofonio (GC) revelaron alteración epidermal e infiltrado celular dermal, compuesto principalmente por fagocitos mononucleares como macrófagos, linfocitos y monocitos, junto a células polimorfonucleares, así como células mastoides en la dermis profunda entre las 5 h y 6 sem pi. Los parásitos no fueron detectados en la epidermis. Las improntas de piel de los ratones BALB/c inyectados con promastigotos de L. mexicana y coloreados con Giemsa mostraron 35,0% y 58,0% de McN a los 30 min y 6 sem pi respectivamente, 96,0% de McA a los 5 d pi, 21,56% de N a las 2 h pi, 3,0% de eosinófilos a las 2 sem pi. Las secciones de piel coloreadas con GC revelaron alteraciones similares a las de la piel de los ratones inyectados con L. braziliensis. En este estudio, utilizamos la inmunotinción con Avidina Biotina y el anticuerpo monoclonal NLDC- 145 específico para caracterizar las células de Langerhans (CL) epidermales murinas, en fragmentos de 1 mm2 de piel de las patas de los ratones. Los resultados mostraron que la inyección de los promastigotos de L. braziliensis en la piel, producen un incremento progresivo de las CL en el sitio de la inyección de los parásitos, estadísticamente significativo (P 0,05). La densidad de las CL epidermales fue aumentando desde los 30 min pi con 200  78,66 CL/mm2, alcanzando un valor máximo de 4502,7  632,4 CL/mm2 a las 6 sem pi. En la piel inyectada con promastigotos de L. mexicana, la densidad de las CL epidermales fue de 2903,5  76,5 CL/mm2 a los 30 min pi y de 729,5  51,5 CL/mm2 a las 2 sem pi. El número de CL fue siempre más alto en los fragmentos de epidermis de los ratones inyectados con Leismania, que en las epidermis de los ratones sanos controles. Estas muestras de piel mostraron entre 275 y 89 CL/mm2. Los resultados de este estudio, revelaron que los promastigotos en la piel son capaces de sobrevivir fuera de los macrófagos hasta 1 h pi. Por otro lado, estos parásitos estimularon la proliferación de varios tipos de células inflamatorias como las CL presentadoras de antígeno en el sitio de inoculación de los parásitos.