Mostrar el registro sencillo del ítem
Expresión y purificación de la hexoquinasa utilizando el sistema homólogo pTcINDEX en epimastigotes recombinantes de Trypanosoma cruzi cepa Ep
dc.contributor.advisor | Cáceres Nicolielly, Ana Judith | |
dc.contributor.author | Parada Puig, Raquel | |
dc.contributor.other | Acosta, Héctor | |
dc.contributor.other | Gómez, Amaranta | |
dc.date.accessioned | 2022-07-22T23:29:13Z | |
dc.date.available | 2022-07-22T23:29:13Z | |
dc.date.issued | 2018-02-07 | |
dc.identifier.uri | http://bdigital2.ula.ve:8080/xmlui/654321/8266 | |
dc.description | Licenciado en Biología | en_US |
dc.description | Cota : QP606 G57P3 | en_US |
dc.description | Biblioteca : B.I.A.C.I. (siglas: euct) | en_US |
dc.description.abstract | T. cruzi posee un metabolismo energético que depende principalmente de glucosa como fuente de carbono y energía. Gran parte de la vía glicolítica en T. cruzi está compartimentalizada en el interior de los glicosomas, y la primera reacción de la ruta corresponde a la transferencia de un grupo fosforilo a la glucosa, catalizada por la HK. Empleando el sistema homólogo pTcINDEX en T. cruzi, el objetivo fundamental de este trabajo fue la caracterización fenotípica de los parásitos mutantes que sobre-expresan la enzima HK-(His)6, la optimización de la expresión y la caracterización de la misma en términos bioquímicos. Los resultados indican que la HK-(His)6 puede ser sobre-expresada 8 veces más respecto a la enzima natural, sin efectos cuantificables sobre el crecimiento, consumo de glucosa, producción de amonio o expresión de las enzimas GlcK y G6PDH. La enzima fue purificada a homogeneidad en un solo paso cromatográfico por IMAC a partir de una fracción enriquecida de glicosomas de los epimastigotes recombinantes inducidos con 5μg/ml de tetraciclina. La HK-(His)6 resultó ser más afín al anómero α de la D-glucosa (KM de 33μM y Vmáx de 0.807U/mg) y fue capaz de fosforilar D-glucosamina (KM de 863μM y Vmáx de 1.27 U/mg), pero fue incapaz de fosforilar N- Acetilglucosamina. | en_US |
dc.format.extent | vii, 48 páginas : ilustraciones | en_US |
dc.language.iso | es | en_US |
dc.publisher | Universidad de Los Andes, Facultad de Ciencias, Departamento de Biología, Laboratorio de Enzimología de Parásitos | en_US |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/ve/ | en_US |
dc.subject | Epimastigotes | en_US |
dc.subject | Glicosoma | en_US |
dc.subject | Hexoquinasa | en_US |
dc.subject | pTcINDEX | en_US |
dc.subject | Purificación | en_US |
dc.subject | Sobre- expresión | en_US |
dc.subject | T. cruzi | en_US |
dc.subject | Glucosamina | en_US |
dc.subject | Glucoquinasa | en_US |
dc.title | Expresión y purificación de la hexoquinasa utilizando el sistema homólogo pTcINDEX en epimastigotes recombinantes de Trypanosoma cruzi cepa Ep | en_US |
dc.type | Thesis | en_US |